實(shí)驗(yàn)步驟


懸浮液或生物膜中的共培養(yǎng)


白色念珠菌和/或細(xì)菌在懸浮液或粘附的生物膜中生長(zhǎng) 在六孔聚苯乙烯板中,在腦心輸液 (BHI) 培養(yǎng)基中,補(bǔ)充有 5% 胎牛血清 (BHI-FBS)。 補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)程序中提供了其他詳細(xì)信息。


集落形成單位分析


菌落形成單位從生物膜或生物膜的系列稀釋液中鋪板 懸浮培養(yǎng)。 稀釋液涂在 YPD 瓊脂、LB 瓊脂或血液上 瓊脂 30 或 37 離心,視物種而定。 補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)程序中提供了其他詳細(xì)信息。


氧氣測(cè)量


使用 Unisense STOX 測(cè)量生物膜中的氧濃度 傳感器微電極,每 10 毫米測(cè)量一次,從 從上到下。 補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)程序中提供了其他詳細(xì)信息。


基因表達(dá)微陣列


Cy3 或 Cy5 標(biāo)記的 cDNA 與定制的安捷倫微陣列雜交, 在 GenePix Pro 中進(jìn)行分析,并使用 LOWESS 進(jìn)行歸一化。 額外細(xì)節(jié) 在補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)程序中提供。


入藏號(hào)


報(bào)告的原始基因表達(dá)陣列數(shù)據(jù)的 GEO 登錄號(hào) 在本文中是 GSE55026。


補(bǔ)充信息


補(bǔ)充信息包括補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)程序、四個(gè)數(shù)字、四個(gè)表格和三個(gè)數(shù)據(jù)集,可以通過(guò) 本文在線 http://dx.doi.org/10.1016/j.cub.2014.08.057。


致謝


我們感謝 Matthew Lohse、Aaron Hernday、Chiraj Dalal、Oliver Homann 和 本研究中使用的菌株或質(zhì)粒的 Jose Christian Perez; 謝娜 Singh Babak 和 Trevor Sorrells 對(duì)手稿發(fā)表評(píng)論; 和 豪爾赫·門(mén)多薩 (Jorge Mendoza) 提供技術(shù)援助。 我們贊賞使用 加州大學(xué)舊金山分校尼康成像中心。 這項(xiàng)研究得到了美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院的資助 R01AI083311(給 ADJ)和加州大學(xué)舊金山分校突破生物醫(yī)學(xué)研究計(jì)劃獎(jiǎng),部分由桑德勒基金會(huì)資助。 EPF 是 由 NIH Fellowship T32AI060537 支持,CJN 由 NIH 支持 授予 K99AI100896,并且霍華德支持 DKN 和 ESC 休斯醫(yī)學(xué)研究所 (HHMI) 和國(guó)家心臟、肺和血液 NIH 研究所 (R01HL117328)。 DKN 是 HHMI 調(diào)查員。


收稿日期:2014 年 3 月 9 日


修訂日期:2014 年 7 月 31 日


接受:2014 年 8 月 22 日


發(fā)布時(shí)間:2014 年 10 月 9 日


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