神經(jīng)細(xì)胞電生理技術(shù)主要包括：膜片鉗技術(shù)（patch clamp recording technique，PCRT）和在體多通道微電極陣列神經(jīng)信號技術(shù)（In vivo multi-channel microelectrode array for neural signal recording technique，M-NEMEA）。

在體多通道同步記錄技術(shù)是采用細(xì)胞外記錄的方法來檢測神經(jīng)元群的同步電活動。該系統(tǒng)包括微電極陣列、數(shù)據(jù)采集和分析系統(tǒng)。應(yīng)用這一技術(shù)可同步記錄多個腦區(qū)的大量神經(jīng)元的電活動，研究不同腦區(qū)的神經(jīng)元放電在時間和空間上的聯(lián)系，進(jìn)而通過分析神經(jīng)元的放電模式來研究大腦對外部事件的編碼機(jī)制〔20〕。

多通道在體記錄技術(shù)，能在自由活動的動物腦內(nèi)，觀察和記錄大腦局部區(qū)域幾十個、上百乃至上千個神經(jīng)元的活動狀況，是目前作為分析群體神經(jīng)元在網(wǎng)絡(luò)水平編碼機(jī)制的有效工具〔21〕。John C Lilly在1949年采用多電極陣列植入的方法研究靈長類的行為和神經(jīng)元的放電關(guān)系，利用了25個微電極記錄到了610個神經(jīng)元的放電〔22〕。在20世紀(jì)中期，研究人員用毛細(xì)玻璃管拉制了玻璃微電極。玻璃微電極的發(fā)明，使研究者可以將電極尖端插入神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，記錄細(xì)胞體或軸突、樹突內(nèi)的電位變化，推動了神經(jīng)電生理學(xué)細(xì)胞水平的研究。

體多通道微電極陣列神經(jīng)信號技術(shù)的技術(shù)特點

M-NEMEA通過離體神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)活動的多通道電生理同步檢測的方法，可研究神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)群體特征的電生理特性，是目前研究神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)發(fā)育和功能特征的重要方法。隨著計算機(jī)技術(shù)的發(fā)展和微加工技術(shù)的提高，微電極陣列技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于離體培養(yǎng)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)放電模式的檢測中，從而為研究神經(jīng)突觸的可塑性，神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)功能連接的形成與再生，以及神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)發(fā)育的規(guī)律及生理節(jié)律提供了技術(shù)支持和保障。目前用于體外神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)電生理檢測的微電極陣列及多通道電生理檢測系統(tǒng)多購自國外廠家，具有軟件操作界面人性化，系統(tǒng)做工精良，系統(tǒng)穩(wěn)定，處理功能強(qiáng)大等優(yōu)點，但也存在不足。例如購買價格昂貴；易損耗，微電極陣列（microelectrode array,MEA）重復(fù)利用率低，多次使用后，表面電極材料會被損耗，影響信號記錄；商業(yè)化系統(tǒng)的功能相對固定，不易進(jìn)一步升級，不能完全滿足實驗室實驗需求〔24〕。

M-NEMEA在視神經(jīng)細(xì)胞的研究及應(yīng)用

M-NEMEA作為細(xì)胞外記錄的方法，通過對神經(jīng)元群同步電活動的檢測，可以同時采集大量細(xì)胞的動作電位的詳細(xì)信息，從而為研究大腦神經(jīng)細(xì)胞及細(xì)胞之間相互作用提供了重要的技術(shù)支持〔23〕，具有重要的意義。Tusa等〔25〕人利用微電極細(xì)胞外記錄的方法對貓初級視皮層感受野進(jìn)行系統(tǒng)的繪測，繪制出皮層17區(qū)和視野的拓?fù)鋵?yīng)關(guān)系圖。陳昕等〔26〕采用玻璃微電極在貓的初級視皮層17區(qū)進(jìn)行細(xì)胞外記錄，并結(jié)合光學(xué)成像法定位貓初級視皮層17區(qū)不同部位的視野拓?fù)涞碾x心度，結(jié)果表明神經(jīng)元的感受野的離心度與光學(xué)記錄到的結(jié)果十分接近，從而為大面積確定皮層細(xì)胞感受野在視野中的位置提供了快速和較準(zhǔn)確的方法。史學(xué)鋒等〔27〕采用微電極陣列神經(jīng)細(xì)胞信號采集技術(shù)對斜視性弱視貓行細(xì)胞電生理檢測，觀察視皮層21a區(qū)神經(jīng)細(xì)胞眼優(yōu)勢的相關(guān)變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與正常組相比，模型組21a雙眼細(xì)胞比例明顯下降，在紋外視皮層斜視性弱視的病理不足更為明顯，神經(jīng)細(xì)胞眼優(yōu)勢明顯轉(zhuǎn)移至正常眼。姚軍平等〔28〕用微電極陣列神經(jīng)細(xì)胞信號采集技術(shù)檢測22 d正常大鼠（Long Evans大鼠，下同）、22 d單眼剝奪大鼠、100 d正常大鼠、100 d單眼剝奪大鼠眼優(yōu)勢柱的分布，結(jié)果發(fā)現(xiàn)22 d正常大鼠、100 d正常大鼠、100 d單眼剝奪大鼠視皮層眼優(yōu)勢柱分布為對側(cè)眼優(yōu)勢，22 d單眼剝奪大鼠視皮層眼優(yōu)勢柱分布為同側(cè)眼優(yōu)勢，表明正常視覺環(huán)境下發(fā)育的Long Evans大鼠，眼優(yōu)勢柱分布為對側(cè)眼優(yōu)勢，其在幼年期視皮層具有可塑性，在異常的視覺環(huán)境下可影響其眼優(yōu)勢柱的分布；而在成年時，Long Evans大鼠視覺可塑性終止，異常的環(huán)境不能影響其眼優(yōu)勢柱的分布。劉虎等〔29〕用微電極陣列神經(jīng)細(xì)胞信號采集技術(shù)檢測斜視性弱視貓紋狀皮層細(xì)胞功能和放電水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)較正常組相比，模型組皮層細(xì)胞數(shù)量明顯減少，眼優(yōu)勢未轉(zhuǎn)移；模型組與正常眼相比眼驅(qū)使皮層細(xì)胞的高端截止空間和最優(yōu)勢空間頻率顯著下降，表明驅(qū)使皮層細(xì)胞的空間特性和兩眼拮抗作用是導(dǎo)致斜視性弱視的原因之一。謝芳等〔30〕用微電極陣列神經(jīng)細(xì)胞信號采集技術(shù)記錄幼貓初級視皮層V1區(qū)峰電位信號和場電位信號，觀察眼優(yōu)勢指數(shù)的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)場電位和鋒電位的眼優(yōu)勢指數(shù)呈正相關(guān)，表明雙眼視刺激的平衡程度直接影響神經(jīng)元的整合作用。徐鵬景等〔31〕通過在體胞外記錄的方法研究視覺系統(tǒng)中二階信號和一階信號是由相同還是不同的通路來完成的。發(fā)現(xiàn)大多數(shù)膝外體細(xì)胞對二階信號存在調(diào)制反應(yīng)，但反應(yīng)強(qiáng)度低于一階信號，并且二階信號反應(yīng)中的非線性成分與線性成分的比值高于一階信號反應(yīng)，表明貓外膝體上一階信號和二階信號的處理可能是由兩類不同的傳遞通路來完成的。

丁娟等〔32〕將健康Wistar大鼠48只分2組進(jìn)行不同目的研究。第一組健康Wistar大鼠24只分為4組，每組6只，除正常組外，其余各組在出生后14（P14）天制作右眼單眼形覺（MD）模型。采用細(xì)胞外記錄技術(shù)觀察各組視皮質(zhì)II/III層突觸傳遞LTP誘發(fā)率，以及各組在高頻刺激（HFS）刺激后，興奮性突觸后電位（EPSP）及群峰電位的變化。結(jié)果表明，①各視皮質(zhì)II/III層LTP誘發(fā)率正常P45天組最高（5/6），最低的為MDP90天組。②高頻刺激后EPSP斜率和群峰電位（PS）幅值不同時段與基礎(chǔ)突觸傳遞水平的比較：EPSP斜率和PS幅值在正常P45天組、正常P90天組HFS后0、30、60 min提高顯著（P＜0.01）。同一時間點比較，HFS后30、60 min各組EPSP斜率以及PS幅值與基礎(chǔ)值之比，組間比較具有顯著性差異（P＜0.01）。從而表明大鼠皮質(zhì)LTP誘發(fā)呈視覺依賴性，MD可降低剝奪眼對側(cè)視皮質(zhì)LTP誘發(fā)率；EPSP斜率，PS幅值對高頻刺激的反應(yīng)受年齡和異常視覺經(jīng)驗影響，年齡越大，以及視覺經(jīng)驗的異常（單眼形覺剝奪）會降低視皮質(zhì)對高頻刺激的反應(yīng)。第二組仍采用細(xì)胞外記錄技術(shù)觀察各組注藥后10、30、60、90 min對基礎(chǔ)突觸傳遞水平的影響。給藥90 min后，給予視皮層質(zhì)Ⅳ層高頻刺激，觀察藥物對視皮質(zhì)Ⅱ/Ⅲ層LTP誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明：①不同濃度天然藥物A對基礎(chǔ)突觸傳遞水平的影響：在MD對照組和正常組側(cè)腦室給予人工腦脊液（ACSF）后10、30、60、90 min EPSP斜率和PS幅值并無明顯變化，天然藥物A隨給藥時間延長能提高EPSP斜率和幅值，高劑量組更具有顯著性。②天然藥物A對高頻刺激誘導(dǎo)的Ⅱ/Ⅲ層LTP的影響：HFS 30、60 min后，EPSP斜率和PS幅值MD高、低劑量給藥組、正常組高于MD對照組（P＜0.01）。從而表明：天然藥物A側(cè)腦室注藥能提高M(jìn)D成年大鼠視皮質(zhì)Ⅱ/Ⅲ層基礎(chǔ)突觸傳遞水平，增強(qiáng)EPSP以及PS幅值，呈劑量依賴性加強(qiáng)HFS對視皮質(zhì)Ⅱ/ⅢLTP的誘導(dǎo)，提高突觸傳遞效能。