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姜黃素(Curcumin)是從姜科、天南星科等植物根莖中提取而得的多酚類化合物,是一種純天然食用色素,具有多種多樣的生物活性,如具有良好的抗氧化性,對(duì)于消炎、抗腫瘤也有著明顯的效果。姜黃素還能夠有效地保護(hù)神經(jīng),預(yù)防老年癡呆的發(fā)生。
姜黃素的檢測(cè)方法主要有高效液相色譜法、分光光度法和電化學(xué)分析法等。相對(duì)于前面幾種檢測(cè)方法,用電化學(xué)處理的方法處理玻碳電極具有實(shí)驗(yàn)操作比較簡(jiǎn)單、實(shí)驗(yàn)成本較低、靈敏度高、響應(yīng)速度快等優(yōu)點(diǎn)。李銀峰用該方法處理電極用于藥根堿的測(cè)定,但用電化學(xué)處理玻碳電極檢測(cè)姜黃素的電分析方法尚未見(jiàn)報(bào)道。筆者將玻碳電極在pH 7.0的PBS溶液中進(jìn)行簡(jiǎn)單的電化學(xué)處理,得到一種新的測(cè)定姜黃素的電化學(xué)處理玻碳電極,用循環(huán)伏安法、計(jì)時(shí)電量法對(duì)所得電極進(jìn)行表征,優(yōu)化了姜黃素測(cè)定的實(shí)驗(yàn)條件,研究了姜黃素在電極上的電化學(xué)行為,并用該電極成功地測(cè)定了中藥材姜黃中的姜黃素的含量。
實(shí)驗(yàn)部分
試劑和儀器
姜黃素:購(gòu)于阿拉丁試劑公司。分析標(biāo)準(zhǔn)品:用乙醇配置成1.0×10-3 mol/L體積為10 mL的溶液,置于0℃~4℃條件下避光保存,備用。中藥材姜黃:購(gòu)于張仲景大藥房。0.10 mol/L的PBS溶液:0.1 mol/L的NaH2PO4(天津南開(kāi)化工廠)和0.1 mol/L的Na2HPO4(北京化工廠)標(biāo)準(zhǔn)溶液混合而成,較低pH的PBS溶液可以采用加入0.10 mol/L的H3PO4(天津市大茂化學(xué))溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。K3[Fe(CN)6]:天津市大茂化學(xué);KCl:天津市德恩化學(xué)試劑有限公司。所用試劑除特殊交代,均為分析純;實(shí)驗(yàn)室用的水全為二次蒸餾水,室溫環(huán)境下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
CHI660電化學(xué)工作站;三電極體系:工作電極為玻碳電極(φ=3 mm),參比電極為飽和甘汞電極,輔助電極為鉑電極。電子天平CP224C;超聲波洗滌器;pH計(jì);50μL微量進(jìn)樣器;磁力攪拌器;離心機(jī)。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程
EPGCE電極的制備
用細(xì)打磨紙和0.5μm的氧化鋁粉末研磨液打磨電極,把電極表面處理成光面;然后,用純凈水沖洗干凈;再用純凈水和乙醇超聲波震蕩,直至徹底清洗干凈;最后烘干,記為裸玻碳電極。將處理后的玻碳電極放到pH=7.0的0.10 mol/L的PBS溶液中,在~1.5 V~2.5 V的電位下用循環(huán)伏安法處理2圈,得到電化學(xué)處理后的玻碳電極(EPGCE)。
實(shí)驗(yàn)方法
將電化學(xué)處理后的玻碳電極放到pH=3.0的濃度為0.1 mol/L的PBS溶液中,用循環(huán)伏安法在0.2 V~0.9 V的電位范圍內(nèi),掃描速度為0.1 V/s時(shí)掃描10周,得到穩(wěn)定的循環(huán)伏安曲線;用純凈水沖洗干凈后,把電極放到5.0×10-6 mol/L的姜黃素溶液中,開(kāi)路富集210 s,然后進(jìn)行循環(huán)伏安掃描2周(掃描速度不變)。由于姜黃素具有吸附性,每次測(cè)定后,要在pH 8.0的堿性溶液下更新電極。
分析應(yīng)用
將在張仲景大藥房購(gòu)買的中藥姜黃在研缽中充分研磨成粉末,準(zhǔn)確稱取1.0020 g粉末于小燒杯中,加入10 mL乙醇,保鮮膜封口,超聲震蕩1 h;離心提取液,重復(fù)上述提取步驟2次。最后將3次提取液混合在一起,水浴加熱蒸發(fā)至10 mL,留著樣品使用。用pH=3.0的0.1 mol/L PBS溶液作為支持電解質(zhì),用實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定,然后加入一定量1.0×10-3 mol/L的姜黃素標(biāo)準(zhǔn)溶液,做回收率實(shí)驗(yàn),結(jié)果如表1所示。實(shí)際樣品測(cè)定的回收率在97.4%~106.7%之間,計(jì)算可得所購(gòu)買的中藥材姜黃中姜黃素的含量為3.93%(姜黃中姜黃素的含量在3%~6%的范圍)。
表1中藥材姜黃中姜黃素測(cè)定的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)(n=3)
結(jié)論
實(shí)驗(yàn)利用姜黃素在電化學(xué)處理玻碳電極的電化學(xué)反應(yīng),建立了中藥材中姜黃素含量測(cè)定的電化學(xué)分析法。優(yōu)化了電化學(xué)處理電極的條件,提高了對(duì)姜黃素測(cè)定的選擇性,研究了姜黃素在電極上的反應(yīng)機(jī)理,完成了姜黃中姜黃素的測(cè)定,結(jié)果令人滿意。該方法可用于中藥材姜黃中姜黃素含量的快速測(cè)定,具有簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)。