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結(jié)果
葡萄漿果的內(nèi)部氧分布
在霞多麗中，[O 2]從表皮向中果皮內(nèi)部減少，在2.2-4毫米深度處達(dá)到低濃度（圖1）。該的最小[O 2深度范圍內(nèi)]為5.5±5.5μmol l–1。然而，隨著進(jìn)一步向漿果中心軸滲透，[O 2]增加并在7毫米深度處達(dá)到最大值（圖1）。為了測(cè)試[O 2]分布是否受到引入的O影響，2的通過(guò)滲透部位N 2在測(cè)量過(guò)程中將氣體輕輕施加到傳感器的入口點(diǎn)。的[O 2對(duì)照和氮處理漿果]分布相似（圖1），表明通過(guò)滲透部位的泄漏不會(huì)影響記錄的分布。
成熟過(guò)程中內(nèi)部氧譜的變化和細(xì)胞死亡的進(jìn)展
為了揭示CD的進(jìn)展與漿果內(nèi)缺氧之間是否存在聯(lián)系，我們使用FDA染色確定了CD，并記錄[O 2了同一天采樣的漿果的]剖面。類似的[O 2 Chardonnay和Ruby Seedless（中觀察到]分布圖2A、C）以及Shiraz在前1.5毫米（圖2E），但，[O 2隨著成熟的進(jìn)行]在整個(gè)果皮上下降得更陡峭在所有品種中，導(dǎo)致整個(gè)[O總體較低2漿果的]。這表現(xiàn)為最低[O低得多2最后成熟階段采樣的]：霞多麗0μmol l–1、紅寶石無(wú)籽14.9±8.86μmol l–1和設(shè)拉子0μmol l–1。由于無(wú)法在設(shè)拉子漿果中看到種子，因此微型氧傳感器無(wú)法移入漿果中超過(guò)約1.6毫米，而不會(huì)危及傳感器的完整性（圖2E）。然而，很明顯，[O 2]急劇下降到1毫米（圖2E）。
圖2
[O2]霞多麗、紅寶石無(wú)核和設(shè)拉子漿果（A、C、E）在不同成熟階段的[O2]剖面圖以及每個(gè)品種（B、D、F）果皮中活組織(LT)的相應(yīng)示例。(A)霞多麗漿果在2015-2016季節(jié)的DAA為87、104和136時(shí)采樣。雙向方差分析（重復(fù)）顯示，深度占總變異的46.7%（P<0.0001），時(shí)間占總變異的29.9%（P<0.0001），交互作用占總變異的8.0%（P=0.058））。水平虛線表示室溫下Millipore水的近似O2飽和值，與測(cè)量時(shí)的漿果相同。(B)用FDA染色的內(nèi)側(cè)縱向切片（霞多麗），突出了不同成熟階段的LT差異（對(duì)應(yīng)于A）。(C)2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的Ruby無(wú)核漿果的[O2]配置文件。雙向方差分析（重復(fù)）顯示深度占總變異的85.2%（P<0.0001），時(shí)間占總變異的1.2%（P=0.0025），交互作用占總變異的3.7%（P=0.048））。(D)Ruby Seedless的LT在兩個(gè)相應(yīng)的采樣日接近100%。(E)2014-2015季節(jié)在85和114 DAA上采樣的設(shè)拉子漿果的[O2]配置文件。插圖顯示了1.5毫米的輪廓細(xì)節(jié)。雙向方差分析（重復(fù)）顯示，深度占總變異的40.9%（P=0.0005），時(shí)間占總變異的19.6%（P<0.0001），交互作用占總變異的6.4%（P=0.43））。(F)設(shè)拉子的LT。數(shù)據(jù)是平均值±SE，對(duì)于(A)、(C)和(E)，n=3。
[O 2]霞多麗、紅寶石無(wú)核和設(shè)拉子漿果（A、C、E）在不同成熟階段的概況以及每個(gè)品種（B、D、F）果皮中活組織（LT）的相應(yīng)示例。(A)霞多麗漿果在2015-2016季節(jié)的DAA為87、104和136時(shí)采樣。雙向方差分析（重復(fù)）顯示，深度占總變異的46.7%（P<0.0001），時(shí)間占總變異的29.9%（P<0.0001），交互作用占總變異的8.0%（P=0.058）。水平虛線表示的近似O 2室溫下Millipore水飽和值，與測(cè)量時(shí)的漿果相同。(B)用FDA染色的內(nèi)側(cè)縱向切片（霞多麗），突出了不同成熟階段的LT差異（對(duì)應(yīng)于A）。(C)[O 2 2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的紅寶石無(wú)核漿果的]概況。雙向方差分析（重復(fù)）顯示深度占總變異的85.2%（P<0.0001），時(shí)間占總變異的1.2%（P=0.0025），交互作用占總變異的3.7%（P=0.048）。(D)Ruby Seedless的LT在兩個(gè)相應(yīng)的采樣日接近100%。(E)[O 2 2014-2015季節(jié)在85和114 DAA上采樣的設(shè)拉子漿果的]概況。插圖顯示了1.5毫米的輪廓細(xì)節(jié)。雙向方差分析（重復(fù)）顯示深度占總變異的40.9%（P=0.0005），時(shí)間占總變異的19.6%（P<0.0001），交互作用占總變異的6.4%（P=0.43）。(F)設(shè)拉子的LT。數(shù)據(jù)是平均值±SE，，n對(duì)于(A)、(C)和(E)=3。
[O2]霞多麗、紅寶石無(wú)核和設(shè)拉子漿果（A、C、E）在不同成熟階段的[O2]剖面圖以及每個(gè)品種（B、D、F）果皮中活組織(LT)的相應(yīng)示例。(A)霞多麗漿果在2015-2016季節(jié)的DAA為87、104和136時(shí)采樣。雙向方差分析（重復(fù)）顯示，深度占總變異的46.7%（P<0.0001），時(shí)間占總變異的29.9%（P<0.0001），交互作用占總變異的8.0%（P=0.058））。水平虛線表示室溫下Millipore水的近似O2飽和值，與測(cè)量時(shí)的漿果相同。(B)用FDA染色的內(nèi)側(cè)縱向切片（霞多麗），突出了不同成熟階段的LT差異（對(duì)應(yīng)于A）。(C)2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的Ruby無(wú)核漿果的[O2]配置文件。雙向方差分析（重復(fù)）顯示深度占總變異的85.2%（P<0.0001），時(shí)間占總變異的1.2%（P=0.0025），交互作用占總變異的3.7%（P=0.048））。(D)Ruby Seedless的LT在兩個(gè)相應(yīng)的采樣日接近100%。(E)2014-2015季節(jié)在85和114 DAA上采樣的設(shè)拉子漿果的[O2]配置文件。插圖顯示了1.5毫米的輪廓細(xì)節(jié)。雙向方差分析（重復(fù)）顯示，深度占總變異的40.9%（P=0.0005），時(shí)間占總變異的19.6%（P<0.0001），交互作用占總變異的6.4%（P=0.43））。(F)設(shè)拉子的LT。數(shù)據(jù)是平均值±SE，對(duì)于(A)、(C)和(E)，n=3。
活力染色（圖2B、F）表明，對(duì)于霞多麗和設(shè)拉子，CD隨著TSS的積累而隨時(shí)間增加，并且主要發(fā)生在中果皮的中部，對(duì)應(yīng)于[O的最小值2]中。此外，霞多麗漿果赤道處熒光信號(hào)強(qiáng)度的變化顯示出與漿果內(nèi)部[O相似的趨勢(shì)2]（圖3A 3A），表明細(xì)胞活力與內(nèi)部[O）之間存在相關(guān)性2]（圖。3B)。另一方面，當(dāng)TSS為20.7°Brix時(shí)，Ruby Seedless漿果在132 DAA下保持接近100%的細(xì)胞活力（圖2D）。雖然類似形狀的[O 2與霞多麗漿果的中果皮相比，在Ruby Seedless漿果的中果皮中觀察到]分布（圖圖2C），但[O 2]沒(méi)有達(dá)到零。
圖3
活組織熒光信號(hào)與[O2]分布之間的相關(guān)性。來(lái)自霞多麗(A)和Ruby Seedless(C)赤道半徑上的FDA染色（高值=較高的活組織）的熒光信號(hào)[相對(duì)灰度（%最大值）]。87和104 DAA上的霞多麗(B)和91和132 DAA(D)上的Ruby Seedless中相應(yīng)深度（對(duì)數(shù)刻度）的熒光信號(hào)強(qiáng)度和[O2]之間的相關(guān)性（戴明回歸）（[O2]分布如圖2所示）。1）。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3。
活組織熒光信號(hào)與[O之間的相關(guān)性2]分布。來(lái)自霞多麗(A)和Ruby Seedless(C)赤道半徑上的FDA染色（高值=較高的活組織）的熒光信號(hào)[相對(duì)灰度（%最大值）]。熒光信號(hào)強(qiáng)度與[O之間的相關(guān)性（戴明回歸）2 87和104 DAA上的霞多麗(B)和91和132 DAA上的Ruby Seedless(D)中相應(yīng)深度（對(duì)數(shù)刻度）處的]（[O 2]分布如圖所示）圖1）。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3。
活組織熒光信號(hào)與[O2]分布之間的相關(guān)性。來(lái)自霞多麗(A)和Ruby Seedless(C)赤道半徑上的FDA染色（高值=較高的活組織）的熒光信號(hào)[相對(duì)灰度（%最大值）]。87和104 DAA上的霞多麗(B)和91和132 DAA(D)上的Ruby Seedless中相應(yīng)深度（對(duì)數(shù)刻度）的熒光信號(hào)強(qiáng)度和[O2]之間的相關(guān)性（戴明回歸）（[O2]分布如圖2所示）。1）。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3。
盡管[O減少2在成熟過(guò)程中整個(gè)中果皮的]，對(duì)于霞多麗和紅寶石無(wú)核漿果，[O 2]開始隨著深度從~4.2毫米增加，并在霞多麗中達(dá)到最大~6.2毫米，在較大的中達(dá)到8.2毫米紅寶石無(wú)核漿果（圖2A、C）。相對(duì)于每個(gè)漿果復(fù)制品（的直徑標(biāo)準(zhǔn)化傳感器的位置圖4 4）表明，）的，[O 2在霞多麗（所有采樣時(shí)間]在中央維管束區(qū)域達(dá)到峰值圖4A）和Ruby Seedless（圖。4B)。
圖4
單個(gè)漿果[O2]配置文件歸一化為漿果半徑。(A)2015-2016季節(jié)在87、104和136 DAA采樣的霞多麗漿果的[O2]分布（平均數(shù)據(jù)如圖2所示）。(B)2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的單個(gè)Ruby無(wú)核漿果的[O2]配置文件。
單個(gè)漿果[O 2]配置文件歸一化到漿果半徑。(A)[O 2 2015-2016季節(jié)在87、104和136 DAA采樣的霞多麗漿果的]分布（平均數(shù)據(jù)如圖所示圖2）。(B)[O 2 2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的單個(gè)紅寶石無(wú)核漿果的]概況。
單個(gè)漿果[O2]配置文件歸一化為漿果半徑。(A)2015-2016季節(jié)在87、104和136 DAA采樣的霞多麗漿果的[O2]分布（平均數(shù)據(jù)如圖2所示）。(B)2016-2017季節(jié)在91和132 DAA下采樣的單個(gè)Ruby無(wú)核漿果的[O2]配置文件。
葡萄漿果內(nèi)氧氣的消耗和供應(yīng)途徑
考慮到CD和[O之間的聯(lián)系2]（圖3），以及發(fā)育良好的Ruby Seedless漿果中缺乏CD（圖2D），我們研究了種子對(duì)霞多麗漿果呼吸需求的貢獻(xiàn).種子鮮重在糖分積累和皮膚著色開始時(shí)達(dá)到峰值，此階段稱為veraison（Ristic和Iland，2005年多麗達(dá)），這里的霞到~63 DAA。按每克鮮重計(jì)算，此階段的種子呼吸比整個(gè)漿果的呼吸高5倍。與63 DAA相比，122 DAA的漿果呼吸減少了約三分之一（圖5A）；然而，種子呼吸減少了40倍（圖5B）。漿果質(zhì)量幾乎翻了一番，從63 DAA時(shí)的7.2±0.5 g到122 DAA時(shí)的13.9±1.4 g；因此，在每個(gè)漿果的基礎(chǔ)上，呼吸速率從63 DAA增加到122 DAA，增加了約18%（圖5C）。漿果中種子總數(shù)的貢獻(xiàn)占veraison漿果呼吸需求的一半以上。這在122 DAA時(shí)下降到一個(gè)微不足道的比例（圖5C）。
圖5
2015-2016季節(jié)在63和122 DAA下的霞多麗漿果和種子呼吸（25°C）。漿果(A)和種子(B)以每克鮮重為基礎(chǔ)的呼吸作用。(C)基于每個(gè)漿果（包括種子）、總種子基礎(chǔ)和單種子基礎(chǔ)的呼吸速率比較。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3。所有比率在63和122 DAA之間都不同（t檢驗(yàn)，P<0.05）。
2015-2016季節(jié)在63和122 DAA下的霞多麗漿果和種子呼吸（25°C）。漿果(A)和種子(B)以每克鮮重為基礎(chǔ)的呼吸作用。(C)基于每個(gè)漿果（包括種子）、總種子基礎(chǔ)和單種子基礎(chǔ)的呼吸速率比較。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3。所有比率在63和122 DAA之間都不同（t檢驗(yàn)，P<0.05）。
2015-2016季節(jié)在63和122 DAA下的霞多麗漿果和種子呼吸（25°C）。漿果(A)和種子(B)以每克鮮重為基礎(chǔ)的呼吸作用。(C)基于每個(gè)漿果（包括種子）、總種子基礎(chǔ)和單種子基礎(chǔ)的呼吸速率比較。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3。所有比率在63和122 DAA之間都不同（t檢驗(yàn)，P<0.05）。
擴(kuò)散到漿果中的阻力差異可能會(huì)影響[O 2]分布?；üＦた卓赡芴峁㎡的途徑，2進(jìn)入這可以解釋朝向漿果中心軸的較高濃度。Chardonnay（之間的皮孔形態(tài)存在明顯差異圖6A）和Shiraz漿果（圖6B）。與設(shè)拉子漿果相比，霞多麗花梗上的單個(gè)皮孔更大，總表面積占花梗表面積的比例也大10倍（圖6C）。
圖6。
霞多麗(A)和設(shè)拉子(B)漿果花梗之間皮孔形態(tài)和相對(duì)皮孔面積的差異。(C)相對(duì)于霞多麗和設(shè)拉子漿果（室內(nèi)種植，2015年）的花梗表面積，使用ImageJ估計(jì)的扁豆面積。(A)和(B)中的比例尺=1 mm。(C)中的數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=5，*顯著不同（t檢驗(yàn)，P<0.05）。
霞多麗(A)和設(shè)拉子(B)漿果花梗之間皮孔形態(tài)和相對(duì)皮孔面積的差異。(C)相對(duì)于霞多麗和設(shè)拉子漿果（室內(nèi)種植，2015年）的花梗表面積，使用ImageJ估計(jì)的扁豆面積。(A)和(B)中的比例尺=1 mm。(C)中的數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=5，*顯著不同（t檢驗(yàn)，P<0.05）。
霞多麗(A)和設(shè)拉子(B)漿果花梗之間皮孔形態(tài)和相對(duì)皮孔面積的差異。(C)相對(duì)于霞多麗和設(shè)拉子漿果（室內(nèi)種植，2015年）的花梗表面積，使用ImageJ估計(jì)的扁豆面積。(A)和(B)中的比例尺=1 mm。(C)中的數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=5，*顯著不同（t檢驗(yàn)，P<0.05）。
為了確定花梗上的皮孔是否可以作為漿果氣體交換的場(chǎng)所，對(duì)相同批次的漿果進(jìn)行呼吸測(cè)量，這些漿果有或沒(méi)有用硅脂覆蓋的梗以阻礙氣體交換。這在20°C和40°C下進(jìn)行了檢查，因?yàn)閷?duì)O呼吸需求2的隨溫度增加（Hertog等人，1998年）。圖7A顯示，在40°C下用硅脂覆蓋漿果梗（和皮孔）可降低設(shè)拉子和霞多麗漿果在40°C下的漿果呼吸，但對(duì)20°C下的呼吸沒(méi)有影響。呼吸的溫度依賴性在霞多麗和西拉更詳細(xì)地進(jìn)行了檢查，既產(chǎn)生相似的活化能和Q 10（補(bǔ)充圖S1，S2在JXB在線）沒(méi)有在兩天每個(gè)品種采樣漿果之間不同。覆蓋花梗的漿果的表觀呼吸減少并不是由于花梗呼吸的消除，因?yàn)?0°C時(shí)的花梗呼吸速率是總漿果呼吸的一小部分（圖7B）并且沒(méi)有解釋減少當(dāng)覆蓋花梗時(shí)觀察到（圖7A），其中花梗覆蓋的設(shè)拉子和霞多麗在40°C下的呼吸減少為839.7±101.8 nmol h–1和1233.9±229.4 nmol h–1每個(gè)漿果。
圖7
花梗在氧擴(kuò)散中作為溫度的函數(shù)的作用。(A)霞多麗(86 DAA)和設(shè)拉子(77 DAA)漿果（每個(gè)漿果）在20°C和40°C下的呼吸，并附有花梗（2016-2017季節(jié)）。硅脂覆蓋花梗上的皮孔（覆蓋漿果）。在20°C下，兩個(gè)品種的對(duì)照和花梗覆蓋的漿果之間的表觀漿果呼吸沒(méi)有顯著差異。不同的小寫字母表示每個(gè)品種在40°C處理之間的顯著差異（雙向方差分析，P<0.0001）。Shiraz和Chardonnay在40°C時(shí)每個(gè)漿果的呼吸作用分別降低了839.7±101.8 nmol h-1和1377.3±161.3 nmol h-1（降低了26%和39%）。(B)整個(gè)漿果的呼吸速率，包括附著的花梗和霞多麗在40°C下的分離花梗的呼吸?；üＵ颊麄€(gè)漿果呼吸率的9%。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3。
花梗在氧擴(kuò)散中作為溫度的函數(shù)的作用。(A)霞多麗(86 DAA)和設(shè)拉子(77 DAA)漿果（每個(gè)漿果）在20°C和40°C下的呼吸作用，并附有花梗（2016-2017季節(jié)）。硅脂覆蓋花梗上的皮孔（覆蓋漿果）。在20°C下，兩個(gè)品種的對(duì)照和花梗覆蓋的漿果之間的表觀漿果呼吸沒(méi)有顯著差異。不同的小寫字母表示每個(gè)品種在40°C處理之間的顯著差異（雙向方差分析，P<0.0001）。Shiraz和Chardonnay降低了839.7±101.8 nmol h–1和1377.3±161.3 nmol h–1在40°C下的呼吸作用中，每個(gè)漿果的呼吸作用分別（降低了26%和39%）。(B)整個(gè)漿果的呼吸速率，包括附著的花梗和霞多麗在40°C下的分離花梗的呼吸?；üＵ颊麄€(gè)漿果呼吸率的9%。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3。
花梗在氧擴(kuò)散中作為溫度的函數(shù)的作用。(A)霞多麗(86 DAA)和設(shè)拉子(77 DAA)漿果（每個(gè)漿果）在20°C和40°C下的呼吸，并附有花梗（2016-2017季節(jié)）。硅脂覆蓋花梗上的皮孔（覆蓋漿果）。在20°C下，兩個(gè)品種的對(duì)照和花梗覆蓋的漿果之間的表觀漿果呼吸沒(méi)有顯著差異。不同的小寫字母表示每個(gè)品種在40°C處理之間的顯著差異（雙向方差分析，P<0.0001）。Shiraz和Chardonnay在40°C時(shí)每個(gè)漿果的呼吸作用分別降低了839.7±101.8 nmol h-1和1377.3±161.3 nmol h-1（降低了26%和39%）。(B)整個(gè)漿果的呼吸速率，包括附著的花梗和霞多麗在40°C下的分離花梗的呼吸?；üＵ颊麄€(gè)漿果呼吸率的9%。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3。
[O快速減少2當(dāng)N時(shí)，在距離花梗約2毫米和靠近紅寶石無(wú)核漿果的中心軸處觀察到]的2流在花梗上被激活（圖8）。
圖8
花梗在氣體擴(kuò)散到Ruby Seedless葡萄中的作用（2016-2017季節(jié)為132 DAA）。三個(gè)單獨(dú)漿果的[O2]作為時(shí)間的函數(shù)，傳感器插入大約Ruby Seedless的中心軸，距花梗約2毫米。虛線表示在花梗上開始外部N2氣體輸送。不同的符號(hào)表示不同的漿果。插圖：在測(cè)量[O2]的同時(shí)在漿果花梗上施加N2氣體的實(shí)驗(yàn)裝置。
花梗在氣體擴(kuò)散到Ruby Seedless葡萄中的作用（2016-2017季節(jié)為132 DAA）。[O 2三個(gè)單獨(dú)漿果的]作為時(shí)間的函數(shù)，傳感器插入大約距離花梗約2 mm的Ruby Seedless的中心軸。虛線表示開始外部N 2在花梗上氣體輸送。不同的符號(hào)表示不同的漿果。插圖：施加N實(shí)驗(yàn)裝置2在測(cè)量[O同時(shí)在漿果花梗上氣體的2]的。
花梗在氣體擴(kuò)散到Ruby Seedless葡萄中的作用（2016-2017季節(jié)為132 DAA）。三個(gè)單獨(dú)漿果的[O2]作為時(shí)間的函數(shù)，傳感器插入大約Ruby Seedless的中心軸，距花梗約2毫米。虛線表示在花梗上開始外部N2氣體輸送。不同的符號(hào)表示不同的漿果。插圖：在測(cè)量[O2]的同時(shí)在漿果花梗上施加N2氣體的實(shí)驗(yàn)裝置。
隨后使用生長(zhǎng)箱培養(yǎng)的霞多麗葡萄藤進(jìn)行了一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，以測(cè)試覆蓋附著在葡萄藤上的漿果的花梗皮孔是否會(huì)影響內(nèi)部[O 2]分布。用硅脂覆蓋漿果梗三天后[O減少，2，中央血管區(qū)域的]并保持在0μmol l附近–1在隨后的15天中（圖9A）。對(duì)于對(duì)照漿果，，[O的最大值2在所有天的測(cè)量中]在中心軸處很明顯。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，TSS的濃度隨著時(shí)間的推移而增加，并且對(duì)于皮孔覆蓋的漿果來(lái)說(shuō)更高（圖9B）。糖/漿果不受覆蓋皮孔的影響（圖9C）。在覆蓋花梗皮孔后第12天和第20天測(cè)量漿果的乙醇濃度。與對(duì)照漿果相比，這些漿果顯示出更高的乙醇含量（圖9D），這與缺氧漿果內(nèi)更多的發(fā)酵一致。通過(guò)在覆蓋皮孔10天后限制氧擴(kuò)散，CD顯著增加（圖9E），這也從跨漿果的橫斷面檢查中明顯看出（圖9F）。
圖9
在成熟過(guò)程中用硅脂覆蓋漿果花梗對(duì)完整霞多麗簇的影響（2017年種植室，空心方塊=對(duì)照，實(shí)心圓圈=覆蓋）。(A)[O2]在漿果的近似中心軸上作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)。雙向方差分析顯示覆蓋花梗減少了[O2](P<0.0001)。(B)覆蓋花梗后漿果的總可溶性固體(TSS)濃度隨時(shí)間的變化。與對(duì)照漿果相比，花梗覆蓋的漿果在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中顯示出顯著更高的TSS（雙向方差分析P=0.003；擬合為二階多項(xiàng)式，實(shí)線=對(duì)照，虛線=覆蓋）。(C)作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)的每個(gè)漿果的糖分。糖/漿果處理之間沒(méi)有發(fā)現(xiàn)顯著差異（組合擬合是二階多項(xiàng)式，實(shí)線）。(D)12天和20天后漿果的乙醇濃度，有（填充）和沒(méi)有（開放）硅脂覆蓋花梗。雙向ANOVA（Tukey多重比較檢驗(yàn)）在覆蓋后20 d顯示出顯著差異（P=0.036）。(E)作為時(shí)間函數(shù)的活組織百分比。覆蓋漿果的擬合線（虛線）的斜率不為零（P=0.008），并且不同于未覆蓋漿果的擬合線（實(shí)線）的斜率（P=0.006）。(F)赤道半徑上的熒光信號(hào)（FDA染色，相對(duì)于最大值，高值=較高的活組織）在覆蓋后14天和18天針對(duì)漿果直徑的變化進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。每個(gè)都顯示了局部加權(quán)散點(diǎn)圖平滑擬合(LOWESS)。覆蓋（虛線）與對(duì)照（實(shí)線）在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)都顯著不同（雙向方差分析，P<0.001）。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3，除了(F)未顯示SE。
在成熟過(guò)程中用硅脂覆蓋漿果花梗對(duì)完整霞多麗簇的影響（2017年種植室，空心方塊=對(duì)照，實(shí)心圓圈=覆蓋）。(A)[O 2]在漿果的近似中心軸上作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)。雙向方差分析顯示覆蓋花梗減少[O 2](P<0.0001)。(B)覆蓋花梗后漿果的總可溶性固體(TSS)濃度隨時(shí)間的變化。與對(duì)照漿果相比，花梗覆蓋的漿果在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中顯示出顯著更高的TSS（雙向方差分析P=0.003；擬合為二階多項(xiàng)式，實(shí)線=對(duì)照，虛線=覆蓋）。(C)作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)的每個(gè)漿果的糖分。糖/漿果處理之間沒(méi)有發(fā)現(xiàn)顯著差異（組合擬合是二階多項(xiàng)式，實(shí)線）。(D)12天和20天后漿果的乙醇濃度，有（填充）和沒(méi)有（開放）硅脂覆蓋花梗。雙向方差分析（Tukey多重比較檢驗(yàn)）在覆蓋后20 d顯示出顯著差異（P=0.036）。(E)作為時(shí)間函數(shù)的活組織百分比。覆蓋漿果的擬合線（虛線）非零（P的斜率=0.008）并且不同于未覆蓋漿果的擬合線（實(shí)線）的斜率（P=0.006）。(F)赤道半徑上的熒光信號(hào)（FDA染色，相對(duì)于最大值，高值=較高的活組織）在覆蓋后14天和18天針對(duì)漿果直徑的變化進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。每個(gè)都顯示了局部加權(quán)散點(diǎn)圖平滑擬合(LOWESS)。覆蓋（虛線）與對(duì)照（實(shí)線）在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)都顯著不同（雙向方差分析，P<0.001）。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3，除了(F)未顯示SE。
在成熟過(guò)程中用硅脂覆蓋漿果花梗對(duì)完整霞多麗簇的影響（2017年種植室，空心方塊=對(duì)照，實(shí)心圓圈=覆蓋）。(A)[O2]在漿果的近似中心軸上作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)。雙向方差分析顯示覆蓋花梗減少了[O2](P<0.0001)。(B)覆蓋花梗后漿果的總可溶性固體(TSS)濃度隨時(shí)間的變化。與對(duì)照漿果相比，花梗覆蓋的漿果在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中顯示出顯著更高的TSS（雙向方差分析P=0.003；擬合為二階多項(xiàng)式，實(shí)線=對(duì)照，虛線=覆蓋）。(C)作為覆蓋花梗后時(shí)間的函數(shù)的每個(gè)漿果的糖分。糖/漿果處理之間沒(méi)有發(fā)現(xiàn)顯著差異（組合擬合是二階多項(xiàng)式，實(shí)線）。(D)12天和20天后漿果的乙醇濃度，有（填充）和沒(méi)有（開放）硅脂覆蓋花梗。雙向ANOVA（Tukey多重比較檢驗(yàn)）在覆蓋后20 d顯示出顯著差異（P=0.036）。(E)作為時(shí)間函數(shù)的活組織百分比。覆蓋漿果的擬合線（虛線）的斜率不為零（P=0.008），并且不同于未覆蓋漿果的擬合線（實(shí)線）的斜率（P=0.006）。(F)赤道半徑上的熒光信號(hào)（FDA染色，相對(duì)于最大值，高值=較高的活組織）在覆蓋后14天和18天針對(duì)漿果直徑的變化進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。每個(gè)都顯示了局部加權(quán)散點(diǎn)圖平滑擬合(LOWESS)。覆蓋（虛線）與對(duì)照（實(shí)線）在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)都顯著不同（雙向方差分析，P<0.001）。數(shù)據(jù)是平均值±SE，n=3，除了(F)未顯示SE。
顯微CT顯示的葡萄漿果內(nèi)的空氣空間
使用微CT，霞多麗漿果在成熟過(guò)程中的兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的內(nèi)部氣隙，其中漿果內(nèi)氣隙的總體積大于500個(gè)體素（1.5×10–3 mm 3），如圖所示10。對(duì)于轉(zhuǎn)色后（98 DAA，顯色性突出了漿果內(nèi)的空氣空間圖10A）和收獲后（154 DAA，，圖10B）漿果?？諝饪臻g與轉(zhuǎn)色后漿果的花梗相連，但在收獲后漿果中不明顯。很明顯，室內(nèi)有更大的空氣空間。漿果近端區(qū)域和種子種臍之間的孔隙率、孔隙和通道在兩天采樣的漿果之間沒(méi)有差異（補(bǔ)充圖S3）。
圖10
X射線顯微CT確定的霞多麗漿果中的空氣空間。(A)在98 DAA(19.3°Brix)和(B)在154 DAA(24.5°Brix)在2015-2016季節(jié)。圖像已被處理以指示漿果輪廓。最小體素截止值為500。框輪廓上的白點(diǎn)間隔1毫米。
X射線顯微CT確定的霞多麗漿果中的空氣空間。(A)在98 DAA(19.3°Brix)和(B)在154 DAA(24.5°Brix)在2015-2016季節(jié)。圖像已被處理以指示漿果輪廓。最小體素截止值為500?？蜉喞系陌c(diǎn)間隔1毫米。
