因此,我們通過測量磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中材料的熱載流子提取情況,評估了3DFG在激光激發(fā)下可能產(chǎn)生的光電流。


測量使用了連接到3DFG微電極的膜片鉗放大器(圖S3)。激發(fā)時,我們使用了波長為1064納米的聚焦皮秒脈沖激光,因為這是通過光聲產(chǎn)生的納米沖擊波進行細胞穿孔的最佳配置。在激發(fā)過程中,激光聚焦在3DFG表面,光斑直徑為2微米,對于所測激光平均入射功率(分別為1.3至7.6毫瓦),功率密度在414至2419瓦/平方毫米之間。圖1D展示了在不同激光強度下3DFG與PBS接觸面產(chǎn)生的光電流。6毫秒激光脈沖序列產(chǎn)生的電流行為表明存在電容電流和法拉第電流的組合,這與之前對硅基納米材料的觀察結果一致。


具體而言,我們觀察到在激光開啟時有一個明顯的初始電流峰值,隨后在激光脈沖序列期間出現(xiàn)一個準穩(wěn)態(tài)電流平臺。在激光脈沖序列結束后,觀察到一個幅度較低的負電流峰值。圖1E展示了不同激光強度下的電容電流和法拉第電流。我們認為法拉第電流可能與3DFG中熱載流子的發(fā)射有關,即那些處于熱平衡之外的高能電子被材料排出并注入電解質(zhì)。在基于石墨烯的3D納米結構中產(chǎn)生熱電子的現(xiàn)象此前已被證實。這些產(chǎn)生的熱載流子已被提出是通過類似于俄歇機制從石墨烯中被彈出。在先前的一項研究中,納米線模板化三維石墨烯(NT-3DFG)在低功率激光照射下表現(xiàn)出高光熱響應,這歸因于光容性而非法拉第機制。


盡管這些結果表明在三維石墨烯中光熱現(xiàn)象占主導地位,但我們已確定了可能造成當前研究中觀察到的法拉第響應的關鍵區(qū)別因素。用于光電流測量的皮秒激光脈沖的峰值功率在1.5至11瓦之間。這一激光功率值范圍比之前關于NT-3DFG的研究中所報告的要高出幾個數(shù)量級。此外,本研究中所用激光的光斑尺寸小于之前的研究(分別為2微米和20微米)。因此,在相同的入射激光功率下,當前測量中的平均功率密度大約高出100倍。這表明三維石墨烯中的激光激發(fā)熱載流子發(fā)射可能遵循閾值機制,因而僅在高峰值功率密度下才會發(fā)生,這與在其他材料中先前觀察到的情況一致。然而,通過超快脈沖激光刺激在三維場效應晶體管(3DFG)中產(chǎn)生熱電子的確切機制仍需進一步探索。


02.3DFG微電極陣列-心肌細胞界面


由于高生物相容性對于實現(xiàn)與細胞的長期穩(wěn)定界面至關重要,我們首先通過評估人胚胎干細胞來源的心肌細胞(hESC-CMs)的細胞活力來研究3DFG可能的毒性效應?;盍蛪毫υ囼炞C實3DFG不會誘導細胞毒性。


隨后,為了研究3DFG電極上細胞的生長和健康狀況,將人誘導多能干細胞來源的心肌細胞(hiPSC-CMs)培養(yǎng)在3DFG微電極陣列上,并進行了免疫組織化學熒光標記。在hiPSC-CMs上,結果表明心肌肌鈣蛋白T(綠色)有大量表達,這突出了心肌結構,正如成熟hiPSC心肌細胞所預期的那樣(圖2A)。圖像還顯示NKX2-5(紅色)的表達量極低,NKX2-5是心臟祖細胞的標志物,僅有15.38±3.47%的細胞表達NKX2-5。這證實了心臟細胞培養(yǎng)總體上已正確成熟。

圖2.3DFG MEA-心肌細胞界面。(A)在3DFG-MEAs上培養(yǎng)7天的hiPSC-CMs的明場(I和III)和免疫熒光圖像(II和IV)。比例尺,100微米(I和II)和50微米(III和IV)。(B)hiPSC-CMs在3DFG MEAs上的偽彩色掃描電子顯微鏡圖像。比例尺,5微米。(C)HL-1細胞在3DFG上的橫截面掃描電子顯微鏡圖像。右側圖像顯示細胞核為綠色,細胞質(zhì)為藍色,3DFG為紅色。比例尺,2微米。


我們還通過橫截面聚焦離子束掃描電子顯微鏡成像評估了3DFG與心肌細胞之間的界面。HL-1細胞和誘導多能干細胞來源的心肌細胞(hiPSC-CMs)在3DFG上培養(yǎng)24小時后進行固定和脫水。在3DFG電極上培養(yǎng)的誘導多能干細胞來源的心肌細胞(hiPSC-CMs)的頂視圖/傾斜視圖掃描電子顯微鏡圖像和HL-1細胞的橫截面掃描電子顯微鏡圖像證實了細胞膜與3DFG之間緊密的黏附。